行业动态首页 > 新闻动态 > 行业动态

克山病糖生物标志物筛选
时间:2019-03-25 14:34:38

糖基化是分泌蛋白翻译后最常见的修饰之一,在细胞间的相互作用、细胞黏附、恶性转化和转移中起重要作用。

今天为大家分享一篇利用凝集素芯片对CKD患者、LKD患者和正常人的血液和唾液进行分析,研究糖蛋白在慢性和潜伏性克山病(CKDLKD)发病机制中作用的文献。该研究结果在《Molecules》在线发表。

 研究思路:

1.      LKDCKD和健康样本收集;

2.      疾病唾液标志物初筛;

3.      疾病血液标志物初筛

4.      唾液标志物验证;

5.      血液标志物验证。

样本设置:

 

初筛

验证

合计

男性CKD

10

15

25

女性CKD

10

15

25

男性LKD

10

15

25

女性LKD

10

15

25

男性健康组

12

15

27

女性健康组

12

15

27

合计

64

90

154

 


1.  凝集素芯片分析男性唾液

选取10例男性LKD10例男性CKD组和12例男性健康对照的唾液样本进行凝集素芯片实验,结果显示LKD组和健康对照组有10种凝集素具有显著性差异。其中LKD组的STLWGA与对照组相比信号较强,而PHA-E +LPTL-ILTLPSAAALConAJacalinGSL-II与对照组相比信号较弱(1 )

CKD组和LKD组进行了比较,发现两组之间有16种凝集素荧光强度存在显著差异。与LKD组相比,CKD组中AALECAPTL-IPNAWFABS-ISJAJacalinPHA-E+L的信号较强,而SBAPSAWGAVVAMAL-IConAACA信号较弱(1)

 

 

1. 男性唾液糖蛋白的糖基化模式

(a) 男性CKDLKD患者和正常对照者唾液中cy3标记的唾液蛋白与凝集素芯片结合的情况。染色强度差异显著的凝集素用白色框框标记;(b)比较三组间凝集素结合水平。条形图表示从凝集素的三个复制点测量的平均+SD

 


 2. 凝集素芯片分析女性唾液

选取10例女性LKD组、10例女性CKD组和12例女性健康对照的唾液样本进行凝集素芯片实验,结果显示女性CKD组和健康对照组有10种凝集素具有显著性差异。与健康对照相比,CKD组中GSL-IRCA120GNASNA的信号较高,而PTL-IPHA-E+LPTL-IIAALLTLHHL信号较弱。

LKD组和健康对照组有8种凝集素具有显著性差异,与正常对照组相比,LKD组中STLGSL-IRCA120信号水平较高,而SBAPSAPTL-IIWGALTL信号较弱 (2)

比较CKD组和LKD组,发现CKD组中MAL-I WGA的荧光强调明显高于LKD组。(2)

 

 

2.女性唾液糖蛋白的糖基化模式

(a) 女性CKDLKD患者和正常对照者唾液中cy3标记的唾液蛋白与凝集素芯片结合的情况,染色强度差异显著的凝集素用白色框框标记;(b)比较三组间凝集素结合水平。条形图表示从凝集素的三个复制点测量的平均+SD

 


 3. 凝集素芯片分析男性血液

对男性CKD组、LKD组和健康对照组的血清样本进行凝集素芯片反应,结果显示LKD组男性血清与正常对照组之间的凝集素差异较小,而CKD组和正常对照组中共有17种凝集素的荧光强度存在显著变化、CKD组和LKD组有14种凝集素荧光强度有显著差异(3)。这表明有些凝集素可能有助于鉴别男性CKDLKD

  

 

3. 男性血清糖蛋白糖基化模式

 (a) 男性CKDLKD患者和正常对照者血液中cy3标记的蛋白与凝集素芯片结合的情况。染色强度差异显著的凝集素用白色框框标记(b) 比较三组间凝集素结合水平。条形图表示从凝集素的三个复制点测量的平均+SD

 


 4. 凝集素芯片分析女性血液

对女性CKD组、LKD和健康组的血清进行凝集素芯片分析(4),结果显示女性CKD血清与正常对照组相比有14种凝集素具有显著性差异、女性LKD组血清与正常对照组相比与正常对照组相比有7种凝集素具有显著性差异、女性CKD组和LKD组血清相比有15种凝集素具有显著性差异

 

 

4. 女性血清糖蛋白糖基化模式

(a) 女性CKDLKD患者和正常对照者血液中cy3标记的蛋白与凝集素芯片结合的情况。染色强度差异显著的凝集素用白色框框标记(b) 比较三组间凝集素结合水平。条形图表示从凝集素的三个复制点测量的平均+SD

 


 

5.  唾液标志物验证

基于前期唾液样本凝集素芯片筛选及数据分析结果,选择了6种凝集素作为唾液标志物进行验证(男性唾液标志物3种,PSASTLWGA;女性唾液标志物3种,RCAPHA-E+LMAL-1)。男性唾液样本芯片结果显示,与健康组相比,CKD组的PSAWGA信号较弱,而STL的信号较强; LKD组的 PSA信号较弱,WGASTL的信号较强 (5),这表明STL可作为男性CKDLKD的诊断生物标志物,而WGA可作为区分这两个阶段的标志物。

 

5.候选标志物验证

(a)唾液微阵列上cy3标记凝集素的扫描图像;(b)从唾液微阵列中获得的六组数据的盒状图分析;(c)唾液芯片获得的6组数据的散点图分析。(CK-M: CKD男性患者,LK-M: LKD男性患者,H- m:正常对照组男性患者,CK-F: CKD女性患者,LK-F: LKD女性患者)

 


小结:

本研究利用凝集素芯片作为研究平台,从唾液和血液以及性别等方面对克山病的诊断标志物进行研究,寻找糖蛋白糖基化模式的变化,发现STL可作为是男性CKDLKD的诊断生物标志物,WGA可能有助于区分这两个阶段

博翀生物可提供本研究中的凝集素芯片等相关服务,欢迎来电来函咨询!

    参考文献:

Sen W , et al,. Roles of Glycoproteins in the Diagnosis and Differential Diagnosis of Chronic and Latent Keshan Disease[J]. Molecules, 2017, 22(5):746.

    博翀凝集素芯片简介:

电话:18922122250 邮箱:info@bcbio.cn 地址:总部:广州市黄埔区科丰路31号G1栋
分部:广东省佛山新城岭南大道南2号
广州博翀生物科技有限公司 版权所有 粤ICP备14007537号 您是第 370 位访客
服务在线 服务在线
服务在线 服务在线